制何首乌提取浓缩及干燥工艺的研究

【关键词】制首乌；二苯乙烯苷；正交实验；高效液相色谱

【摘要】目的以制首乌中二苯乙烯苷的含量为考察指标，优选出最佳且适合大生产的工艺条件。方法采用高效液相色谱（HPLC）法检测样品中的二苯乙烯苷含量，对提取、浓缩及干燥工艺条件进行比较，使二苯乙烯苷尽可能少地被破坏。结果采用70%的乙醇回流提取3次，第1次10倍量提取2h，第2次8倍量提取2h，第3次8倍量提取1h，在碱性条件真空浓缩后喷雾干燥即可。结论该工艺科学、可行、稳定，适合大生产。

制何首乌具有补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨之功效，制首乌颗粒具有增强免疫功能、抗氧化作用、延缓大脑衰老、提高DNA修复功能、延长寿命、能促进肠蠕动、抑制甘油三酰（TG）及胆固醇在肠道中的吸收，从而降低血脂，降低胆固醇，改善脂肪代谢等多项功能，其有效成分为二苯乙烯苷类化合物[1].临床用于血虚萎黄，眩晕耳鸣，须发早白，腰膝酸软，肢体麻木，崩漏带下，高血脂等。本实验主要对制首乌的提取、浓缩及干燥工艺进行了筛选。现报道如下。

1仪器与试药

Agilent1100型高效液相色谱仪。制何首乌药材，购于河北安国市场，经鉴定为蓼科植物何首乌PolygonummultiflorumThunb.的干燥块根炮制方法加工品[2]；流动相所用甲醇为色谱纯试剂，水为重蒸水，其他试剂均为分析纯；二苯乙烯苷对照品：购自中国药品生物制品检定所（批号：110844-200404）。

2方法与结果

2.1二苯乙烯苷含量测定方法

2.1.1色谱条件与系统适用性试验色谱柱：C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相为乙腈-水（22∶78）；柱温30℃，流速1.0ml/min；检测器为紫外检测器；检测波长320nm.

2.1.2对照品溶液的制备精密称二苯乙烯苷对照品15.20mg，置50ml容量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为0.304mg/ml的二苯乙烯苷对照品溶液。

2.1.3供试品溶液的制备取制成的提取样品干膏细粉0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，称定重量，加热回流30min，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，上清液用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。

2.1.4测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

2.2提取正交实验结果

2.2.1正交实验因素水平的设计选取对提取影响较大的4个因素进行考察：提取次数（A），提取时间（B），加醇量（C），醇的浓度（D），以二苯乙烯苷的量为指标进行正交实验，因素水平见表1.

表1水提取因素水平

水平A提取次数B提取时间t/hC加醇量/倍D醇的浓度（%）111660221.58703321080

2.2.2实验方法先将制何首乌饮片粉碎取10目与50目之间颗粒，共取9份颗粒各20g，按正交设计进行实验，合并提取液浓缩加水定容为500ml，对其检测，计算。平行进行两次正交实验医学教。育网。搜集整理。
2.2.3实验结果结果见表2.表2正交实验结果

由直观分析可知：以总二苯乙烯苷为考察指标时，4个因素的影响大小顺序为：提取次数>醇的浓度>提取时间>加醇量。最佳工艺为A3B2C3D2，即用70%乙醇提取3次，2h/次，每次加10倍量的乙醇提取。

2.2.4方差分析将试验数据进行方差分析，对各因素影响大小的显著性进行了F值检验。结果见表3.

分析表明，提取次数、提取时间、加醇量、醇浓度都是重要因素，为缩短生产周期，节约成本，但又不影响二苯乙烯苷的提取，故优选的提取工艺条件定为：A3B（2.2.1）C（3，2，2）D2，即第1次提取2h，加10倍量70%乙醇，第2次提取2h，加8倍量70%乙醇，第3次提取1h，加8倍量70%乙醇。其验证实验结果表明最佳工艺与选定工艺试验结果差别不大，表明优选工艺稳定可行。表3方差分析结果

2.3浓缩工艺与结果取制何首乌适量，按确定的工艺进行提取；分别取醇提水沉液20kg共4份，其中两份pH值为6.0，在常压下浓缩（50～60℃）；另外两份的其中一份调pH值为8.5，采用减压（真空-0.08MPa，50～60℃）浓缩。在浓缩至相对密度约为1.10，1.20和1.30左右时，取样检测总二苯乙烯苷含量，结果得出最佳浓缩条件为碱性条件下减压浓缩。结果见表4.表4不同浓缩工艺各浓度下二苯乙烯苷含量变化。

2.4干燥工艺与结果取制何首乌适量，按确定的工艺进行提取和浓缩；取稠膏40kg平均分成4份，一份放入60℃恒温循环烘干箱中常压干燥，一份放入60℃真空干燥箱中（压力0.65大气压）干燥成干膏，一份采用喷雾干燥（进风温度为145℃）制成喷雾粉，一份采用微波干燥成干膏，分别取干膏粉检测总二苯乙烯苷总含量，结果得出最佳干燥条件为喷雾干燥。结果见表5.表5不同干燥工艺下二苯乙烯苷含量变化。

3结论